1 材料與方法
1.1 材料與試劑
老窖泥（1#
、2#
、3#
）：某老酒廠優(yōu)質(zhì)大曲酒發(fā)酵池乙醇醋酸鈉培養(yǎng)基：乙酸鈉0.5%，磷酸氫二鉀0.04%，
硫酸鎂0.02%，硫酸銨0.05%，酵母膏0.1%，調(diào)節(jié)pH至7.0，121 ℃高壓蒸氣滅菌20 min，接種前加入無水乙醇2%。
1.2 儀器與設備
SW-CJ-ZFD雙人單面潔凈工作臺：蘇州蘇潔凈化設備
有限公司；MJX-250C立式恒溫培養(yǎng)箱：上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設備有限公司；LDZX-75KB立式壓力蒸汽滅菌
鍋：上海申安醫(yī)療器械廠；ALC-1104電子天平：賽多利斯科
學儀器有限公司；Agilent 6820氣相色譜（gas chromatography，
GC）儀：美國安捷倫公司；DHG-9071A電熱恒溫干燥箱：上
海精宏實驗設備有限公司；722E可見分光光度計：上海光
譜儀器有限公司；LEICA電子顯微鏡：德國LEICA公司；DK98-II雙列八孔電熱恒溫水浴鍋：天津市泰斯特有限公司；
C1000 Touch聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，
PCR）儀：美國伯樂公司。
2 結果與分析
隨著發(fā)酵溫度的升高，菌株A-3的己酸含量呈先升高后下降
的趨勢。當發(fā)酵溫度為37 ℃時，己酸含量最高，為8.17 g/L。
當發(fā)酵溫度低于11 ℃或高于57 ℃時，則幾乎不產(chǎn)己酸，故
最適發(fā)酵溫度為37 ℃，溫度耐受范圍為13～55 ℃。
3 結論
通過對老窖泥的多次富集培養(yǎng)，從3#
老窖泥中篩選得
到3株高產(chǎn)己酸的菌株A-1、A-3和A-5，己酸產(chǎn)量分別為
5.73 g/L、9.77 g/L、7.45 g/L。通過形態(tài)觀察及分子生物學技
術鑒定3株菌株均為克魯維氏梭菌（Clostridium kluyveri）。
其中Clostridium kluyveri A-3己酸產(chǎn)量最高，對其發(fā)酵性能
進行測定。結果表明，Clostridium kluyveri A-3在22 h后進入
對數(shù)期，80 h后進入穩(wěn)定期，其產(chǎn)己酸的最佳初始pH值為
7.0，發(fā)酵時間為14 d，發(fā)酵溫度為37 ℃，乙醇含量為2%，pH
耐受范圍為3.0～11.0，乙醇最高耐受含量為5%，溫度耐受
范圍為13～55 ℃。
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